Caracterización química y actividad antimicrobiana del aceite esencial de las hojas de Libanothamnus neriifolius (Asteraceae) / Chemical characterization and antimicrobial activity of the essential oil of the leaves of Libanothamnus neriifolius (Asteraceae)

El aceite esencial de las hojas frescas de Libanothamnus neriifolius (B. ex H) Ernst., fue obtenido por el método de hidrodestilación utilizando la trampa de Clevenger, obteniendo 1.8 mL (rendimiento 0.087%). El aceite esencial se caracterizó por el método de cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas (CG-EM), identificando como compuestos principales β-felandreno (29.04%), α-felandreno (19.86%), α-pineno (13.57%) y α-tujeno (12.35%). La actividad antimicrobiana se determinó por el método de difusión en agar con discos, frente a bacterias y levaduras de referencia internacional (Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 23357, Pseudomonas aureginosa ATCC 27853, Candida albicans CDC-B385, Candida krusei ATCC 6258). El aceite esencial inhibió el desarrollo de S. aureus, C. albicans y C. Krusei, con un valor de Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) de 50 μL/mL, 700 μL/mL y 500 μL/mL, respectivamente. Este es el primer reporte sobre actividad antimicrobiana para L. neriifolius y para el género Libanothamnus.

The essential oil of the fresh leaves of Libanothamnus neriifolius (B. ex H) Ernst. was obtained by the hydrodistillation method using the Clevenger trap, obtaining 1.8 mL (0.087% yield). The essential oil was characterized by the method of gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC/MS), identifying as main compounds, that β-phelandrene (29.0%), α-phelandrene (19.9%), α-pinene (13.6%), and α-tujene (12.4%) were the most abundant constituents. Antimicrobial activity of the oil was tested Staphylococcus aureus ATCC25923, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 23357, Pseudomonas aureginosa ATCC 27853, Candida albicans CDC-B385, Candida krusei ATCC 6258 by the agar difusion method. It showed activity against S. aureus with MIC of 50 μL/mL. With respect to antifungic activity it was active against C. albicans and C. krusei with MIC of 700 μL/mL and 500 μL/mL respectively. This is the first report on the antimicrobial activity of this L. neriifolius and for the genere Libanothamnus.

Antimicrobial activity of four Valeriana (Caprifoliaceae) species endemic to the Venezuelan Andes / Actividad antimicrobiana de cuatro especies de Valeriana (Caprifoliaceae) endémicas de los Andes venezolanos

Abstract Valeriana L. genus is represented in Venezuela by 16 species, 9 of these are endemic of Venezuelan Andes growing in high mountains at 2 800 masl. In this investigation, four species were analyzed in order to determine the main secondary metabolites and antimicrobial activity of extracts obtained from aerial parts of Valeriana parviflora, V. rosaliana, V. triplinervis and V. phylicoides. Alkaloids, flavonoids, tannins, sterols, triterpenoids and saponins were qualitatively observed in all methanolic extracts tested. The color intensity or a precipitate formation was used as analytical response to these tests. Antimicrobial activity was evaluated against Gram positive, Gram negative bacterial strains and yeast, using disc diffusion method. N-hexane extracts of V. triplinervis and V. rosaliana showed the highest efficiency against Staphylococcus aureus, exhibiting inhibition zones of 16 mm and 15 mm; MIC (Minimal Inhibition Concentration) values were observed at 116 mg/mL and 150 mg/mL, respectively. Dichloromethane and methanolic extracts of V. triplinervis and methanolic extract of V. rosalianashowed a rather moderate activity (MIC between 200 to 316 mg/ml) but a very weak antibacterial activity was observed in V. phylicoides and V. parviflora extracts (MIC > 420 mg/mL). None of the extracts assayed in this investigation showed any activity against Candida albicansand Candida krusei. Statistical analysis showed no significant differences on the different polarity extracts assayed with respect to antimicrobial activity against S. aureus (P > 0.10), however it was observed significant differences between the Valeriana species analyzed (P < 0.10) in relation to the minimal inhibitory concentration (MIC). Rev. Biol. Trop. 66(3): 1282-1289. Epub 2018 September 01.

Resumen El género Valeriana, está representado en Venezuela por 16 especies, 9 de las cuales son endémicas de Los Andes y crecen en las altas montañas a 2 800 msnm. En esta investigación cuatro especies fueron analizadas para determinar los principales metabolitos secundarios y la actividad antimicrobiana de los extractos obtenidos de las partes aéreas de Valeriana parviflora, V. rosaliana, V. triplinervis y V. phylicoides. Compuestos como alcaloides, flavonoides, taninos, estroles, triterpenos y saponinas fueron detectados cualitativamente en todos los extractos metanólicos ensayados. La intensidad del color o la formación de un precipitado se tomaron como respuesta positiva para estos análisis. Actividad antimicrobiana fue evaluada frente a bacterias Gram positivas, Gram negativas y levaduras, usando el método de difusión en discos. Los extractos en n-hexano de V. triplinervis y V. rosaliana mostraron la mayor eficiencia frente a Staphylococcus aureus, mostrando zonas de inhibición de 16 mm y 15 mm con valores de CIM (Concentración Inhibitoria Mínima) observados a 116 mg/mL y 150 mg/mL, respectivamente. Los extractos con diclorometano y metanol de V. triplinervis y metanol de V. rosaliana revelaron moderada actividad (CIM entre 200 y 316 mg/ml), mientras actividad muy leve se observó en los extractos de V. phylicoides y V. parviflora (CIM > 420 mg/mL). Ninguno de los extractos ensayados mostraron actividad frente a Candida albicans y Candida krusei. Los análisis estadísticos mostraron que no hay diferencia significativa entre los solventes de diferentes polaridades con relación a la actividad antimicrobiana frente a S. aureus (P > 0.10), sin embargo, sí se observó diferencia significativa (P < 0.10), entre las especies de Valeriana ensayadas con respecto a la concentración inhibitoria mínima (CIM).

Composición química y actividad antibacteriana del aceite esencial de Peperomia acuminata de los Andes venezolanos / Chemical composition and antibacterial activity of essential oil Peperomia acuminata from Venezuelan Andes

El género Peperomia (Piperaceae), es bien conocido por sus especies ornamentales y usos etnomedicinales. En el presente trabajo se describe la caracterización química y la actividad antibacteriana del aceite esencial de Peperomia acuminata Ruiz & Pav. proveniente del Estado Mérida Venezuela. El aceite esencial se obtuvo por hidrodestilación de las hojas y la separación de los componentes se realizó por Cromatografía de gases-Espectrometría de Masas (CG/EM). Se logró la elucidación de ocho compuestos (96,7%), siendo el 2E-dodecenal el componente mayoritario (65%) seguido de dodecanal (14,8%) y tetradecanal (9,2%). Esta investigación muestra el potencial del aceite esencial de P. acuminata frente a bacterias Gram positivas (Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Enterococcus faecalis 29212), con un valor de Concentración inhibitoria mínima de 1μL/mL. Este es el primer reporte sobre la composición química del aceite esencial de esta especie, por lo tanto una contribución importante al estudio del género Peperomia.

The genus Peperomia (Piperaceae) is well known for its ornamental species and ethnomedicinal uses. This paper aims to chemically characterize the essential oil of Peperomia acuminata Ruiz & Pav. from Mérida State, Venezuela, and determine its microbiological activity. The essential oil is obtained by hydrodistillation of the leaves and the separation of the components was performed by gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS). Eight compounds (96.7%) were elucidated in the oil. The 2E dodecenal was found to be the major component (65%) followed by dodecanal (14.8%) and tetradecanal (9.2%). The essential oil showed high specificity against Gram positive bacteria Staphylococcus aureus ATCC (25923) and Enterococcus faecalis (29212) with a Minimum Inhibitory Concentration of 1 µL/mL. This is the first report about chemical composition of the essential oil from this specie therefore an important contribution to the study of the genus Peperomia.

Chemical composition and antibacterial activity of Piper lenticellosum C.D.C essential oil collected in Ecuador.

The essential oil of the leaves and spikes of Piper lenticellosum C. DC. (Piperaceae) was isolated by hydrodistillation and analyzed by GC/MS. A yield of 2.06 % was obtained. Twenty eight components were identified by comparison of their mass spectra with Wiley GC-MS library data and the retention indices (RI) calculated for every compound. The major constituents were piperitone (33.97 %), 1,8 cineole (11.92 %), limonene (11.07 %), safrole (8.18 %) and α-pinene (4.49 %). Antibacterial activity of the essential oil was evaluated against five important human pathogenic bacterial strains using the disk diffusion agar method. The results showed at moderate activity against Staphylococcus aureus ATCC (25923), Escherichia coli ATCC (25922) and Klebsiella pneumoniae ATCC (233357) with minimal inhibitory concentration (MIC) values of 100, 200 y 300 µL/mL, respectively. According to the literature consulted, this is the first report on chemical composition and antibacterial activity of the essential oil of Piper lenticelosum C. DC. from Ecuador.

Construcción de mutantes de salmonella enterica por inactivación de los genes invG/invE y ssaJ/ssaK de las islas de patogenicidad 1 y 2 / Construction of mutants of salmonella enterica for inactivation of invG/invE y ssaJ/ssaK genes of pathogenicity islands 1 and 2

Para la comprensión de las bases genéticas de los mecanismos de patogenicidad de Salmonella se han descrito diversas metodologías para manipular el ADN genómico y generar mutantes con características particulares. En este estudio se reporta la construcción de mutantes a partir de varios serotipos de S. enterica, por sustitución e inactivación de los genes invG/invE en SPI-1 y de los genes ssaJ/ssaK en SPI-2 mediante la técnica de recombinasa Red del fago λ descrita por Datsenko y Wanner (2000). Los genes delecionados en las SPI-1 y SPI-2 codifican para las proteínas que participan en la formación de los sistemas de secreción tipo III, responsables de la invasión y supervivencia intracelular de S. enterica en las células hospedadoras. Los resultados de este trabajo permitirán realizar estudios futuros in vivo para evaluar la posible atenuación de la virulencia de las cepas mutantes, así como aportar nuevos conocimientos sobre los mecanismos genéticos involucrados en la fisiopatogenia de las enfermedades producidas por los serovares estudiados. Además, esta técnica se recomienda para generar de manera eficiente mutantes de diferentes serotipos de S. enterica con la finalidad de estudiar los genes cromosómicos y sus productos.

To understand the genetic basis of Salmonella pathogenicity mechanisms, various methods have been described to manipulate and generate mutant genomic DNA with specific characteristics. In this study we report the construction of mutants from several serotypes of S. enterica, substitution and inactivation of genes invG/invE in SPI-1 gene and ssaJ/ssaK in SPI-2 by the technique of phage λ Red recombinase, as described by Datsenko and Wanner (2000). The gene deletion in SPI-1 and SPI-2 encodes proteins involved in the formation of type III secretion systems responsible for the invasion and intracellular survival of S. enterica in the host cells. The results of this work will allow in vivo studies to evaluate the possible attenuation of virulence of the mutant strains, as well as to provide new insights into the genetic mechanisms involved in the pathogenesis of diseases caused by these bacteria. Moreover, this technique is recommended to efficiently generate mutants of different serotypes of S. enterica in order to study the chromosomal genes and their products.

Regulación inmuno-testicular y citocinas / Immune-testicular regulation and cytokines

La patogénesis de la infertilidad masculina se puede reflejar en una alteración de la espermatogénesis, causada por cáncer testicular, aplasia de las células germinales, varicocele, factores ambientales o defecto en el transporte de los espermatozoides, entre otros. En general, un 48 por ciento de hombres cursa con esterilidad sin causa aparente. Durante mucho tiempo, el tracto reproductor masculino y el sistema inmunológico han sido estudiados como sistemas diferentes e independientes. Sin embargo, en las dos últimas décadas se ha despertado un particular interés por la interacción de ambos sistemas en la infertilidad masculina, con énfasis en la evaluación de anticuerpos antiespermáticos como causa común de infertilidad. Además, la inflamación debida a infecciones genitales o sistémicas puede causar alteraciones en la función testicular. El reconocimiento de los antígenos intratesticulares, provoca la producción de anticuerpos por parte de los linfocitos B. Luego, el sistema inmunológico induce una respuesta celular, mediante la secreción de citoquinas, activación del complemento y activación de los linfocitos T. En la presente revisión se examinar n los componentes y el mecanismo de respuesta del sistema inmunológico, la organización del testículo como órgano reproductor, los mediadores de la respuesta inmunológica: interleucina-1 (IL-1), IL-6 Factor Inhibidor de la Leucemia, Factor de necrosis tumoral a, Molécula FasL (CD95L) y Fas (CD95), Factor inhibitorio de la migración de macrófagos, Factor Estimulador de las Colonias de Fagocitos Mononucleares y Factor Estimulador de las Colonias de Granulocitos/macrófagos, así como Factor de Células Madres, Interferón, Factor de Transformación y Crecimiento ß y activinas.

Aislamiento de helicobacter pylori en mucosa gástrica placa dental y saliva en una población de Los Andes venezolanos / Isolation of helicobacter pylori in gastric mucosa dental plaque and saliva a population from the Venezuelan Andes

La infección por H. pylori es una de las más comunes en el hombre. Sin embargo, los reservorios extragástricos y las vías de transmisión permanecen en el campo de lo controversial. La cavidad oral ha sido propuesta como reservorio de H. pylori, por lo que se realizó un estudio para determinar la presencia de H. pylori en placa dental y saliva asociando estos resultados con los obtenidos en biopsia gástrica. Se estudiaron 97 pacientes dispépticos y 50 pacientes sin dispepsia a quienes se les tomó muestras de biopsia gástrica, placa dental y saliva. Las muestras de biopsia gástrica fueron evaluadas mediante métodos microbiológicos e histológicos. A las muestras de cavidad oral se les realizó cultivo y prueba de la ureasa y se incluyó un método de pretratamiento, usando urea y HCl. La prevalencia de infección por H. pylori fue de 75,5 por ciento en la totalidad de los pacientes evaluados. No se logró aislar H. pylori en saliva y placa dental de ninguno de los dos grupos estudiados, con o sin pretratamiento de la muestra. La prueba de la ureasa en placa dental fue positiva en 99,3 por ciento de los pacientes y 89,8 por ciento en saliva. No hubo diferencia estadísticamente significativa entre la frecuencia de infección por H. pylori en pacientes dispépticos y sin dispepsia. Los resultados obtenidos sugieren que la metodología empleada para la detección de H. pylori no es suficientemente sensible para la determinación del microorganismo en cavidad oral

Actividad antimicrobiana de los extratos etanólico, acetónico y acuoso de baccharis nitida (Ruiz at Pavon) Pers / Antimicrobial activity of acetonic etanolic extracts and nitida baccharis asqueous (Ruiz et Pavon) Pers

Se han utilizado diversas técnicas microbiológicas para demostrar la actividad antimicrobiana de plantas superiores frente a microorganismos patógenos para el hombre. En el presente estudio se realizaron evaluaciones de la actividad antimicrobiana de los extractos etanólico, acetónico y acuoso, de la partes aéreas de baccharis nitida (Ruiz et Pavon) Pers, frente a staphylococcus aureus (ATCC25923), enterococcus faecalis (ATCC29212), escherichia coli (ATCC25992), pseudomonas aeruginosa (ATCC27853) y candida albicans (aislado clínico, LBM Nº 151), por método de difusión en agar modificado. Los resultados obtenidos muestran acción antibacteriana de todos los extractos sólo contra S. aureus. Sin embargo, en el caso de P. aeruginosa (ATCC27853) se estimuló el desarrollo de la bacteria, y no ejerció ninguna actividad sobre C. albicans